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鸡禽流感病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法) 使用說明書

發布于:2013-12-06

文章來源:

雞禽流感病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)使用說明書

【産品名稱】

威廉希尔体育名:雞禽流感病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)

英文名:Diagnostic Kit for Antibodies to Avian Influenza Virus (ELISA)

【包裝規格】 96T/

【預期用途】 禽流感(Avian influenza,AI)是目前危害海内养禽业的一种急性接触性病毒性熏染病。疫苗免疫是预防和控制禽流感发生的最有效途径,而免疫后抗体水平的崎岖反映实际的疫苗免疫效果,直接关系到免疫鸡群对禽流感病毒的反抗力。

    試劑盒適用于差异品種、差异日齡雞的血清中禽流感病毒特異性抗體的檢測。可用于禽流感(全病毒)疫苗免疫效果評價、免疫時間的確定分析、地區雞群禽流感免疫狀況評價等。

【原    理】

本試劑盒系由預包被禽流感病毒(AIV)重組抗原的微孔板和酶標記二抗及其他配套試劑組成,應用酶聯免疫法(ELISA)原理檢測雞血清或血漿中禽流感病毒特異性抗體。實驗時,在包被板中加入對照血清和稀釋的待檢血清,經溫育後,若樣品中含有禽流感病毒的特異性抗體,則將與包被板上抗原結合,經洗滌除去未結合的抗體和其他身分後;再加入酶標二抗,與包被板上抗原抗體複合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶結合物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色産物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應後,産物變爲黃色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有特異性抗體。

【儲存及有效期】

于2~8℃避光生存,有效期爲12個月。

包被板開封後請于2~8℃避光生存,使用期限爲1個月。

【試劑盒組成】

1.

禽流感病毒抗原預包被微孔板條

96T×1

2.

酶標記物  (紅蓋)

11ml×1

3.

樣品稀釋液  (黃蓋)

50ml×1

4.

20X濃縮洗滌液  (透明蓋)

40ml×1

5.

底物液A  (白蓋)

7ml×1

6.

底物液B  (黑蓋)

7ml×1

7.

終止液  (黃蓋)

7ml×1

8.

陽性對照 (紅蓋,已灭活)

0.5 ml×1

9.

陰性對照 (綠蓋,已滅活)

0.5 ml×1

10.

蓋板膜

1

11.

自封袋

1

12.

說明書

1

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 






【樣品制備】  取動物全血,按常規要领制備血清,要求血清清亮,無溶血、無汙染。樣品短期可于2~8℃生存,長期需置-20℃生存。

【樣品稀釋】  用樣品稀釋液将待检血清按100倍稀释(如5μl血清加入495μl樣品稀釋液中,混匀)。阴、陽性對照不用稀释。
【洗滌液配制】濃縮洗滌液使用前应恢复至室温(25℃左右),并摇动使沉淀的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
【試驗操作要领】

1.使用前將試劑盒置室溫30分鍾,恢複至室溫。

2.取所需用量微孔板条,设空白对照1孔、阴性/陽性對照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃生存。

3.空白对照孔加樣品稀釋液100μl;阴性/陽性對照孔划分加入阴性/陽性對照血清100μl;样品孔每孔加入稀释后的血清样品100μl。

4.混勻,置37℃反應30分鍾。

5.扣去孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去,重複洗滌5次,拍幹。

6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反映30分钟。

7.洗滌,同步驟5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應10分鍾。

9.每孔加終止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A450)。

【結果判定】

1.陰性對照:正常情况下,陰性對照孔A值≤0.10;

2.陽性對照:正常情况下,陽性對照孔A值≥0.6;

3.临界值(C.O)的盘算:C.O=0.13+陰性對照孔均值(陰性對照孔均值低于0.07时以0.07盘算);

4.結果判定:樣品A值≥C.O爲陽性;樣品A值<C.O爲陰性。

【試驗要领的局限性】

    該試驗僅作爲定性檢測雞血清或血漿中禽流感病毒IgG抗體,根據A值崎岖可作抗體水平強、中、弱的简陋評估。

【注意事項】

1.實驗操作時需戴手套、穿事情衣,嚴格健全和執行消毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應按傳染物處理。

2.終止液具有腐蚀性,应制止接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。

3.微孔板從冷藏環境中取出時應恢複至室溫方可開袋,未用完的微孔板需放入有幹燥劑的密封袋中生存。

4.濃縮洗滌液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以完全溶解。

5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有遊離酶不能洗淨。

6.用于檢測的樣品應保持新鮮。

7.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數爲准。

8.差异批號試劑組分不得混用。

【生産企業】

企業名稱:深圳williamhill体育网页版生物技術有限公司

地    址:深圳市寶安區石岩宏發高新園研發大廈509

電    話:0755-23499189

傳    真:0755-23499025

郵    編:518108

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鸡禽流感病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法) 使用說明書

發布于:2013-12-06

雞禽流感病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)使用說明書

【産品名稱】

威廉希尔体育名:雞禽流感病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)

英文名:Diagnostic Kit for Antibodies to Avian Influenza Virus (ELISA)

【包裝規格】 96T/

【預期用途】 禽流感(Avian influenza,AI)是目前危害海内养禽业的一种急性接触性病毒性熏染病。疫苗免疫是预防和控制禽流感发生的最有效途径,而免疫后抗体水平的崎岖反映实际的疫苗免疫效果,直接关系到免疫鸡群对禽流感病毒的反抗力。

    試劑盒適用于差异品種、差异日齡雞的血清中禽流感病毒特異性抗體的檢測。可用于禽流感(全病毒)疫苗免疫效果評價、免疫時間的確定分析、地區雞群禽流感免疫狀況評價等。

【原    理】

本試劑盒系由預包被禽流感病毒(AIV)重組抗原的微孔板和酶標記二抗及其他配套試劑組成,應用酶聯免疫法(ELISA)原理檢測雞血清或血漿中禽流感病毒特異性抗體。實驗時,在包被板中加入對照血清和稀釋的待檢血清,經溫育後,若樣品中含有禽流感病毒的特異性抗體,則將與包被板上抗原結合,經洗滌除去未結合的抗體和其他身分後;再加入酶標二抗,與包被板上抗原抗體複合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶結合物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色産物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應後,産物變爲黃色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有特異性抗體。

【儲存及有效期】

于2~8℃避光生存,有效期爲12個月。

包被板開封後請于2~8℃避光生存,使用期限爲1個月。

【試劑盒組成】

1.

禽流感病毒抗原預包被微孔板條

96T×1

2.

酶標記物  (紅蓋)

11ml×1

3.

樣品稀釋液  (黃蓋)

50ml×1

4.

20X濃縮洗滌液  (透明蓋)

40ml×1

5.

底物液A  (白蓋)

7ml×1

6.

底物液B  (黑蓋)

7ml×1

7.

終止液  (黃蓋)

7ml×1

8.

陽性對照 (紅蓋,已灭活)

0.5 ml×1

9.

陰性對照 (綠蓋,已滅活)

0.5 ml×1

10.

蓋板膜

1

11.

自封袋

1

12.

說明書

1

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 






【樣品制備】  取動物全血,按常規要领制備血清,要求血清清亮,無溶血、無汙染。樣品短期可于2~8℃生存,長期需置-20℃生存。

【樣品稀釋】  用樣品稀釋液将待检血清按100倍稀释(如5μl血清加入495μl樣品稀釋液中,混匀)。阴、陽性對照不用稀释。
【洗滌液配制】濃縮洗滌液使用前应恢复至室温(25℃左右),并摇动使沉淀的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
【試驗操作要领】

1.使用前將試劑盒置室溫30分鍾,恢複至室溫。

2.取所需用量微孔板条,设空白对照1孔、阴性/陽性對照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃生存。

3.空白对照孔加樣品稀釋液100μl;阴性/陽性對照孔划分加入阴性/陽性對照血清100μl;样品孔每孔加入稀释后的血清样品100μl。

4.混勻,置37℃反應30分鍾。

5.扣去孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去,重複洗滌5次,拍幹。

6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反映30分钟。

7.洗滌,同步驟5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應10分鍾。

9.每孔加終止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A450)。

【結果判定】

1.陰性對照:正常情况下,陰性對照孔A值≤0.10;

2.陽性對照:正常情况下,陽性對照孔A值≥0.6;

3.临界值(C.O)的盘算:C.O=0.13+陰性對照孔均值(陰性對照孔均值低于0.07时以0.07盘算);

4.結果判定:樣品A值≥C.O爲陽性;樣品A值<C.O爲陰性。

【試驗要领的局限性】

    該試驗僅作爲定性檢測雞血清或血漿中禽流感病毒IgG抗體,根據A值崎岖可作抗體水平強、中、弱的简陋評估。

【注意事項】

1.實驗操作時需戴手套、穿事情衣,嚴格健全和執行消毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應按傳染物處理。

2.終止液具有腐蚀性,应制止接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。

3.微孔板從冷藏環境中取出時應恢複至室溫方可開袋,未用完的微孔板需放入有幹燥劑的密封袋中生存。

4.濃縮洗滌液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以完全溶解。

5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有遊離酶不能洗淨。

6.用于檢測的樣品應保持新鮮。

7.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數爲准。

8.差异批號試劑組分不得混用。

【生産企業】

企業名稱:深圳williamhill体育网页版生物技術有限公司

地    址:深圳市寶安區石岩宏發高新園研發大廈509

電    話:0755-23499189

傳    真:0755-23499025

郵    編:518108

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